Seroprevalence and hematological abnormalities associated with Ehrlichia canis in dogs referred to a veterinary teaching hospital in central-western Brazil / Soroprevalência e alterações hematológicas associadas com Ehrlichia canis em cães encaminhados a um hospital veterinário-escola no centro-oeste do Brasil

Ticks are significant parasites of dogs in the tropics, where tick-borne pathogens are highly prevalent, especially in areas where tick control measures are frequently neglected. This study investigated the seroprevalence and hematological abnormalities associated with Ehrlichia canis in dogs referred to a veterinary teaching hospital in Central-western Brazil. Out of 264 dogs tested for anti-Ehrlichia canis antibodies by an indirect immunofluorescence assay (IFA), 59.1% (156/264) were positive. Seropositivity was significantly associated to anemia and thrombocytopenia, alone or in combination, and to leukopenia. Conversely, there were no differences in terms of seroprevalence according to sex, breed and age. This study demonstrated that dogs referred to a veterinary teaching hospital in Central-western Brazil are highly exposed to E. canis and that seropositive dogs are more likely to present hematological abnormalities, particularly anemia, thrombocytopenia and leukopenia. To our knowledge, this is the first study on detection of anti-E. canis antibodies by means of IFA among dogs in the state of Goiás. These findings highlighted the need for increasing awareness among dog owners regarding tick control measures in Central-western Brazil, ultimately to reduce the risk of exposure to E. canis and other tick-borne pathogens.

Carrapatos são importantes parasitos de cães nos trópicos, onde patógenos transmitidos por carrapatos são altamente prevalentes, especialmente em áreas onde as medidas de controle de carrapatos são frequentemente negligenciadas. O estudo investigou a soroprevalência e as anormalidades hematológicas associadas à Ehrlichia canis em cães encaminhados para um hospital veterinário-escola no Centro-oeste do Brasil. Dos 264 cães testados para anticorpos anti-Ehrlichia canis por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), 59.1% (156/264) foram positivos. A soropositividade foi associada significativamente à anemia e trombocitopenia, isoladamente ou em combinação, e à leucopenia. Por outro lado, não houve diferenças quanto à soroprevalência segundo sexo, raça e idade. Este estudo demonstrou que cães encaminhados a um hospital veterinário-escola na região Centro-oeste do Brasil são altamente expostos à E. canis, e que cães soropositivos têm maior probabilidade de apresentar alterações hematológicas, principalmente anemia, trombocitopenia e leucopenia. Para o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo sobre a detecção de anticorpos anti-E. canis por meio da RIFI em cães do estado de Goiás. Essas descobertas destacam a necessidade de aumentar a conscientização entre os proprietários de cães em relação às medidas de controle do carrapato no Centro-oeste do Brasil, em última análise, para reduzir o risco de exposição ao E. canis e outros patógenos transmitidos por carrapatos.

Perfil clínico e laboratorial de cadelas sororeativas para erliquiose tratadas em um Hospital Veterinário Universitário em Niterói, Estado do Rio de Janeiro, Brasil / Clinical and laboratory profile of dogs seroreactive to ehrlichiosis treated at the Veterinary Medical Teaching Hospital in Niterói, State of Rio de Janeiro, Brazil

Ehrlichiosis is a tick-borne disease highly prevalent in Brazil, and is relevant in canine clinical practice due to its high morbidity and mortality. Its clinical signs are nonspecific and its phases are acute, lasting 2 to 4 weeks; subclinical, i.e., asymptomatic; and chronic, resembling an autoimmune disease. The purpose of this study was to identify the occurrence of reactivity to Ehrlichia canis of bitches treated at the Veterinary Medical Teaching Hospital of the Universidade Federal Fluminense (UFF) - Niterói, RJ, Brazil, based on serological examination by iELISA, and to compare the hematological, biochemical, urinary protein-creatinine and urinary density profiles of reactive and non-reactive animals. This study involved solely bitches, regardless of breed, starting at 1 year of age. One hundred and thirty bitches, 1 to 16 year-old (mean age 7.02 ± 4.00), weighing 1.5 to 50 kg (mean weight 12.12 ± 10.65) were subjected to clinical examination and abdominal ultrasound. Complete blood count, biochemical measurements, urinalysis and serology for E. canis were also performed. The serum was used in the iELISA to identify immunoglobulin G (IgG), using a canine Ehrlichia Imunotest® diagnostic kit (Imunodot®, Jaboticabal, SP, Brazil) according to the manufacturer's instructions. Sixty animals (46.20%) were reactive to E. canis. According to their owners, only 5 (8.3%) of the 60 seroreactive animals had a history of tick-borne disease. The most common profile was that of mixed breed animals living with their owners, older than 7 years, who had not been treated preventatively with specific drugs against ectoparasites. Laboratory tests showed significant differences between groups in terms of total protein (TP), and calcium and urinary protein-creatinine ratio (UPC). TP and UPC were elevated in the non-reactive group, while the only significant change in the reactive group was mild hypocalcemia. In this study, 30% (18/60) of the bitches were seroreactive to E. canis and had hypocalcemia. Of these, 50% (9/18) had a UPC above 0.5. Furthermore, 66.7% (12/18) of this group with hypocalcemia also showed urine density (UD) of less than 1024. Among these 18 bitches, 5 had both alterations, i.e., UPC > 0.5 and UD < 1024. In this study, a high prevalence of bitches seroreactive to Ehrlichia canis was observed, despite the absence of clinical and/or laboratory signs indicative of the disease. In the investigation of IgG class antibodies, it is not possible to determine the exact time of infection, and titers may remain high for a period of more than 11 months, even after treatment and elimination of the bacterium. The fact that most seroreactive bitches showed no symptoms compatible with the disease either before or during the study suggests that they were in the subclinical phase of ehrlichiosis. The main reason for calcium metabolism disorders is a phosphorus imbalance, a condition that occurs in kidney diseases. Isosthenuria reflects the kidney's inability to concentrate urine. This finding may be one of the first clinical manifestations of chronic kidney disease (CKD), especially in dogs. On the other hand, the UPC ratio may increase with the progression of CKD. The presence of hypocalcemia, isosthenuria and increased UPC associated with seroreactivity suggests that infection by E. canis may be associated with the onset of CKD. Veterinarians should keep in mind the complexity of the pathophysiology of ehrlichiosis to ensure the disease is not underdiagnosed in any of its phases, thereby ensuring the correct treatment is provided. Such awareness is expected to reduce the chronicity of the disease and underlying sequelae among dogs.(AU)

Canine ehrlichiosis: prevalence and epidemiology in northeast Brazil / Erliquiose canina: prevalência e epidemiologia no nordeste do Brasil

Ehrlichiosis is a zoonotic disease that is caused by bacteria of the genus Ehrlichia. The aims of this study were to detect the presence of Ehrlichia spp. in the blood of dogs in Ituberá, Bahia, and to compare the sensitivities and specificities of blood smear, serological, and molecular examinations. Furthermore, this study identified factors associated with exposure to the agent in dogs in this locality. Blood samples were collected from 379 dogs and submitted for indirect immunofluorescent assay and polymerase chain reaction testing for the detection of Ehrlichia spp. antibodies and DNA, respectively. Additionally, a peripheral blood smear was obtained from the ear tip for parasite identification. Of the 379 animals, 12.4%, 32.7%, and 25.6% were identified as positive on the blood smear, serological, and molecular tests, respectively. The dogs positive in one of the three techniques were considered exposed (46.9%). Younger dogs and rural habitat were protective factors and presence of ticks and contact with other dogs were the risk factors associated with exposure to the agent. It was concluded that dogs of Ituberá have high positivity for Ehrlichia spp. and that the diagnostic methods used for detection are complementary.

Erliquiose é uma doença zoonótica causada por bactérias do gênero Ehrlichia. O objetivo desse estudo foi detectar a presença de Ehrlichia spp. no sangue de cães em Ituberá-BA, e comparar as sensibilidades e especificidades do esfregaço sanguíneo, e testes sorológico e molecular. Além disso, esse estudo identificou fatores associados com a exposição ao agente em cães desta localidade. Amostras de sangue foram coletadas de 379 cães e submetidas à Reação de Imunofluorescência Indireta e Reação em Cadeia de Polimerase para detecção de anticorpos e DNA de Ehrlichia spp., respectivamente. Adicionalmente, sangue periférico de ponta de orelha foi coletado para identificação do parasita. Dos 379 animais, 12,4%, 32,7% e 25,6% foram identificados como positivos no esfregaço sanguíneo, teste sorológico e molecular, respectivamente. Cães positivos em uma das três técnicas foram considerados expostos (46,9%). Cães mais novos e hábitat rural foram fatores de proteção e presença de carrapatos e contato com outros cães foram os fatores de risco associados à exposição ao agente. Foi concluído que, os cães do município de Ituberá têm alta positividade para Ehrlichia spp. e que os diferentes métodos diagnósticos utilizados para sua detecção são complementares.

Survey of Ehrlichia canis, Babesia spp. and Hepatozoon spp. in dogs from a semiarid region of Brazil / Pesquisa de Ehrlichia canis, Babesia spp. e Hepatozoon spp. em cães de uma região semiárida do Brasil

This study assessed the occurrence of Ehrlichia spp., Babesia spp. and Hepatozoon spp. infections in 100 tick-harboring dogs from a semiarid region of the State of Paraíba, Northeastern Brazil. Blood samples and ticks were collected from the animals, and a questionnaire was submitted to dog owners to obtain general data. Blood samples were used to perform hemogram, direct blood smear and immunological and molecular hemoparasite detection. The 1,151 ticks collected were identified as Rhipicephalus sanguineus; direct smears revealed E. canis-like morulae in the monocytes of 4% (4/100) of the non-vaccinated female dogs, and 34% and 25% of the dogs tested positive for Ehrlichia canis by indirect immunofluorescence assay (IFA) and polymerase chain reaction (PCR), respectively. Blood smear examination revealed Babesia-suggestive merozoites in the erythrocytes of 2% (2/100) of the animals. Babesia vogeli was detected by PCR in ten animals (10%) and was correlated with young age (p = 0.007) and thrombocytopenia (p = 0.01). None of the animals showed Hepatozoon spp. positivity. These results indicate that E. canis is the main tick-borne canine pathogen in the study area and provide the first report of B. vogeli infection in dogs from Paraiba State.

O presente estudo avaliou a ocorrência de infecção por Ehrlichia spp., Babesia spp. e Hepatozoon spp. em 100 cães, infestados por carrapatos, oriundos de uma região semiárida do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil. Amostras de sangue e de carrapatos foram coletadas dos animais, e um questionário foi submetido aos proprietários dos cães para obter dados gerais. As amostras de sangue foram utilizadas para realização de hemograma, esfregaço sanguíneo e detecção molecular dos hemoparasitos. Os 1.151 carrapatos coletados foram identificados como Rhipicephalus sanguineus; os esfregaços sanguíneos revelaram mórulas sugestivas de E. canis em 4% (4/100) de cães fêmeas não vacinadas, e 34% e 25% dos cães foram positivos para Ehrlichia canis pela imunofluorescência indireta (IFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR), respectivamente. Os esfregaços sanguíneos revelaram merozoítas sugestivas de Babesia em eritrócitos de 2% (2/100) dos animais. Babesia vogeli foi detectada por PCR em dez animais (10%) e foi correlacionada com a idade jovem (p=0,007) e trombocitopenia (p=0,01). Nenhum dos animais apresentou positividade para Hepatozoon spp. Esses resultados indicam que E. canis é o principal patógeno canino transmitido por carrapato, na área estudada, e fornece o primeiro relato de infecção por B. vogeli em cães do Estado da Paraíba.

Recombinant gp19 as a potential antigen for detecting anti-Ehrlichia canis antibodies in dog sera / gp19 recombinante como um antígeno potencial para detecção de anticorposanti-Ehrlichia canis em soros de cães

The canine monocytic ehrlichiosis, caused by Ehrlichia canis, is endemic in several regions of Brazil. Some serological diagnostic techniques using immunodominant proteins of E. canis as antigens are available, but their specificities and sensitivities are questionable. Based on this, the objective of this study was to test the antigenic potential of the recombinant gp19 protein (rGP19) for subsequent use in diagnostic tests. The rGP19 expressed in the Escherichia coli strain BL21 (DE3) C41 was recognized in the sera from experimentally infected dogs using ELISA and Western blotting. Thus, it was possible to obtain a promising antigen with the ability to differentiate between E. canis-positive and -negative animals, even 1 week after infection.

A erliquiose monocítica canina, causada por Ehrlichia canis, é uma doença endêmica em diversas regiões do Brasil. Algumas técnicas de diagnóstico sorológico, utilizando proteínas imunodominantes de E. canis como antígenos, estão disponíveis, porém suas especificidades e sensibilidades são questionáveis. Com base nesse fato, o objetivo deste trabalho foi testar o potencial antigênico da proteína GP19 recombinante (rGP19) para posterior utilização em testes diagnósticos. A rGP19, expressa em E. coli cepa BL21 (DE3) C41, foi reconhecida por soros de cães experimentalmente infectados pelas técnicas de ELISA e Western blotting. Dessa maneira, conseguiu-se obter um antígeno promissor com a capacidade de diferenciar animais positivos de negativos, até mesmo uma semana após a infecção.

Molecular and serological detection of Ehrlichia canis in naturally exposed dogs in Iran: an analysis on associated risk factors / Detecção molecular e sorológica de Ehrlichia canis em cães naturalmente expostos no Irã: uma análise dos fatores de risco associados

The general aim of this study, which was conducted for the first time in Iran, was to evaluate the seroprevalence and geographical distribution of Ehrlichia canis in a dog population in Iran, followed by molecular confirmation using PCR and sequencing. Blood samples were collected from 240 dogs in different areas of Alborz and Tehran Provinces and initially analyzed using the immunofluorescent antibody (IFA) test to detect anti-Ehrlichia canis IgG antibodies. Subsequently, nested PCR was performed based on a fragment of the 16S rRNA gene of E. canis on serologically positive samples. The results showed that 40/240 dogs (16.6%) presented anti-Ehrlichia canis IgG antibodies and that nine of the blood samples from the 40 seropositive dogs (22.5%) contained E. canis DNA, which was confirmed by sequencing. The seroprevalence of E. canis tended to be higher in purebred, one to three-year-old male dogs living in the Plain zone, in rural areas; however, this difference was not statistically significant.

O objetivo geral deste estudo, que foi feito pela primeira vez no Irã, foi avaliar a soroprevalência e distribuição geográfica de Ehrlichia canis em população de cães no Irã, seguida da confirmação molecular por meio de PCR seguida de sequenciamento. Amostras de sangue de 240 cães de diferentes áreas das Províncias de Alborz e Teerã foram coletadas e, inicialmente, analisadas pelo Reação de Imunofluorescência (IFA) para detecção de anticorpos IgG anti-Ehrlichia canis Subsequentemente, uma reação do tipo nested PCR baseada em um fragmento do gene 16S rRNA de E. canis foi realizada nas amostras sorologicamente positivas. Os resultados mostraram que 40/240 cães (16,6%) apresentaram anticorpos IgG anti- Ehrlichia canis e nove (22,5%) das amostras de sangue dos 40 cães soropositivos continham DNA de E. canis, confirmado por sequenciamento. A soroprevalência de E. canis, embora não estatisticamente significativa, mostrou uma tendência em se apresentar maior em cães machos com 1-3 anos, de raça pura, que vivem em zonas planas e áreas rurais.

Hematological values associated to the serological and molecular diagnostic in cats suspected of Ehrlichia canis infection / Valores hematológicos associados ao diagnóstico sorológico e molecular de gatos suspeitos de infecção por Ehrlichia canis

The literature contains several studies on feline ehrlichiosis. However, information about the characteristics of Ehrlichia infection in cats is still scanty. This study evaluated the association between Ehrlichia spp. infection and the hematologic data of 93 cats treated at the Federal University of Mato Grosso Veterinary Hospital in Cuiabá, state of Mato Grosso, Brazil. The presence of or exposure to Ehrlichia spp. infection was evaluated by Polymerase Chain Reaction (PCR) targeting the dsb and 16S rRNA gene of Ehrlichia, and by detection of anti-Ehrlichia canis IgG antibodies in Indirect Fluorescence Assay (IFA), respectively. Eight (8.6%) cats tested positive by PCR and the partial DNA sequence obtained from PCR products was a 100% match to E. canis. Forty-two (45.1%) cats showed antibody reactivity against Ehrlichia spp. Hematological alterations such as low erythrocyte count, thrombocytopenia, lymphopenia and monocytosis were observed in PCR positive cats. Among them, low erythrocyte counts were associated with IgG antibody titers of 40 to 640 and five cats also tested positive by PCR. Furthermore, PCR-positive cats showed a tendency to be lymphopenic. No correlation was found between age and sex, and no ticks were observed in any of the examined cats.

Diversos estudos sobre erliquiose felina vêm sendo relatados na literatura. No entanto, a caracterização da infecção por Ehrlichia em gatos ainda é escassa. O presente estudo objetivou avaliar a associação entre infecção por Ehrlichia e dados hematológicos em 93 gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso, em Cuiabá, Brasil. A presença de infecção por Ehrlichia spp. foi avaliada pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) visando à amplificação dos genes dsb e 16S rRNA de Ehrlichia e por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Oito (8,6%) gatos demonstraram ser positivos pela PCR, sendo suas sequências parciais de DNA 100% idênticas à E. canis. Quarenta e dois gatos (45,1%) apresentaram anticorpos reativos contra Ehrlichia spp. Alterações hematológicas como baixas contagens de eritrócitos, trombocitopenia, linfopenia e monocitose foram observadas em gatos positivos pela PCR. Dentre essas, eritropenia foi associada em gatos com títulos de anticorpos IgG entre 40 e 640, sendo cinco destes positivos pela PCR. Adicionalmente, gatos positivos na PCR apresentaram uma tendência a serem linfopênicos. Não foram observadas associações entre a presença de infecção nos gatos e suas respectivas idades e sexo. Nenhum carrapato foi observado nos gatos examinados.

Molecular and serological detection of tick-borne pathogens in dogs from an area endemic for Leishmania infantum in Mato Grosso do Sul, Brazil / Detecção sorológica e molecular de patógenos transmitidos por carrapatos em cães de uma área endêmica para Leishmania infantum do estado do Mato Grosso do Sul

Tick-borne pathogens affect a wide range of vertebrate hosts. To identify tick-borne pathogens among dogs from Campo Grande, MS, Brazil testing seropositive for Leishmania infantum (syn. L. chagasi), a serological and molecular study was conducted to detect Ehrlichia canis, Anaplasma platys and Babesia vogeli in 60 serum and spleen samples. A confirmatory diagnosis of L. infantum based on serological and molecular assays was also performed, as was sequence alignment and phylogenetic analysis to assess the identity of the parasite species infecting these animals. IgG antibodies to Ehrlichia spp., B. vogeli and L. infantum were found, respectively, in 39 (65%), 49 (81.6%) and 60 (100%) of the sampled dogs. Twenty-seven (45%), fifty-four (90%), fifty-three (88.3%), two (3.3%) and one (1.6%) dog were positive, respectively, for E. canis, Leishmania spp., Leishmania donovani complex, Babesia sp. and Anaplasma sp. in PCR assays. After sequencing, the amplicons showed 99% of identity with E. canis, B. vogeli, A. platys and Leishmania chagasi isolates. The findings of this study indicate that L. infantum-seropositive dogs from Campo Grande are exposed to multiple tick-borne pathogens, which should therefore be included in the differential diagnosis of dogs with clinical suspicion of leishmaniasis.

Patógenos transmitidos por carrapatos atingem uma variedade de hospedeiros vertebrados. Para identificar os agentes patogênicos transmitidos por carrapatos entre cães soropositivos para Leishmania infantum no município Campo Grande-MS, foi realizado um estudo sorológico e molecular para a detecção de Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia vogeli em 60 amostras de soro e baço, respectivamente. Adicionalmente, foi realizado o diagnóstico confirmatório de L. infantum por meio de técnicas sorológicas e moleculares. Também foi realizado o alinhamento e análise filogenética das sequências para indicar a identidade das espécies de parasitas que infectam esses animais. Anticorpos IgG anti-Ehrlichia spp., anti-B. vogeli e anti-L. infantum foram detectados em 39 (65%), 49 (81,6%) e 60 (100%) dos cães amostrados, respectivamente. Vinte e sete (45%), cinquenta e quatro (90%), cinquenta e três (88,3%), dois (3,3%) e um (1,6%) cães mostraram-se positivos na PCR para E. canis, Leishmania spp., Leishmania donovani complex, Babesia sp. e Anaplasma sp., respectivamente. Após o seqüenciamento, os amplicons mostraram 99% de similaridade com isolados de E. canis, B. vogeli e A. platys e Leishmania chagasi. Os resultados deste estudo indicaram que os cães soropositivos para L. infantum de Campo Grande, MS, são expostos a vários agentes transmitidos por carrapatos, e, portanto, devem ser incluídos no diagnóstico diferencial em cães com suspeita clínica de leishmaniose.

Serosurvey for tick-borne diseases in dogs from the Eastern Amazon, Brazil / Pesquisa sorológica por doenças transmitidas por carrapatos em cães da Amazônia oriental, Brasil

Canine ehrlichiosis and babesiosis are the most prevalent tick-borne diseases in Brazilian dogs. Few studies have focused attention in surveying tick-borne diseases in the Brazilian Amazon region. A total of 129 blood samples were collected from dogs living in the Brazilian eastern Amazon. Seventy-two samples from dogs from rural areas of 19 municipalities and 57 samples from urban stray dogs from Santarém municipality were collected. Serum samples were submitted to Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) with antigens of Babesia canis vogeli, Ehrlichia canis, and six Rickettsia species. The frequency of dogs containing anti-B. canis vogeli, anti-E. canis, and anti-Rickettsia spp. antibodies was 42.6%, 16.2%, and 31.7%, respectively. Anti-B. canis vogeli antibodies were detected in 59.6% of the urban dogs, and in 29.1% of the rural dogs (P < 0.05). For E. canis, seroprevalence was similar among urban (15.7%) and rural (16.6%) dogs. For Rickettsia spp., rural dogs presented significantly higher (P < 0.05) prevalence (40.3%) than urban animals (21.1%). This first study on tick-borne pathogens in dogs from the Brazilian eastern Amazon indicates that dogs are exposed to several agents, such as Babesia organisms, mostly in the urban area; Spotted Fever group Rickettsia organisms, mostly in the rural area; and Ehrlichia organisms, in dogs from both areas studied.

Ehrliquiose canina e babesiose canina são as doenças parasitárias transmitidas por carrapatos de maior prevalência em cães do Brasil. Poucos estudos pesquisaram doenças transmitidas por carrapatos na região da Amazônia brasileira. Um total de 129 amostras de sangue foram colhidas de cães da Amazônia oriental brasileira. Setenta e dois cães eram de áreas rurais de 19 municípios do Estado do Pará, e 57 amostras foram colhidas de cães errantes vadios da área urbana do município de Santarém-PA. As amostras de soro foram submetidas ao ensaio de imunofluorescência indireta, com antígenos de Babesia canis vogeli, Ehrlichia canis, e seis espécies de Rickettsia. A frequência de cães com anticorpos anti-B. canis vogeli, anti-E. canis, e anti-Rickettsia spp. foi de 42,6%, 16,2% e 31,7%, respectivamente. Anticorpos anti-B. canis vogeli foram detectados em 59,6% dos cães urbanos, e em 29,1% dos cães rurais (P < 0.05). Para E. canis, a soroprevalência foi parecida entre os cães urbanos (15,7%) e rurais (16,6%). Para Rickettsia spp., cães rurais apresentaram prevalência (P < 0.05) significativamente maior (40,3%) do que os cães urbanos (21,1%). Esse primeiro estudo sobre agentes transmitidos por carrapatos entre cães da Amazônia oriental brasileira indica que estes animais estão expostos a vários agentes. Estes incluem Babesia principalmente na área urbana, Riquétsias do grupo da Febre Maculosa principalmente nas áreas rurais, e Erliquia em cães de ambas as áreas, rural e urbana.

Molecular detection of Ehrlichia canis in dogs from the Pantanal of Mato Grosso State, Brazil / Detecção molecular de Ehrlichia canis em cães do Pantanal do Mato Grosso, Brasil

The present study evaluated the presence of Ehrlichia DNA in the blood samples of 320 dogs from the urban and rural areas of the municipality of Poconé, Pantanal region, Mato Grosso state, by Polymerase Chain Reaction (PCR), targeting the ehrlichial dsbgene. Risk factors for infection in dogs were also evaluated. Forty-eight (15%, 95% CI: 11.4-19.5%) dogs were positive: 25 (15.6%, 95% CI: 10.4-22.2%) from the urban area and 23 (14.4%, 95% CI: 9.3-20.8%) from the rural area (P > 0.05). Partial DNA sequence obtained from PCR products of 18 samples from the urban area and 16 samples from the rural area were 100% identical to E. canis from Brazil and the USA. This study reports the first E. canis molecular detection in dogs from the northern Pantanal region.

O presente estudo avaliou a presença de DNA de Ehrlichia spp. em 320 cães das áreas urbana e rural do município de Poconé, região do Pantanal de Mato Grosso, pela PCR visando o gene dsb. Os fatores de risco para a infecção em cães também foram avaliados. Quarenta e oito (15%, IC 95%: 11,4-19,5%) cães foram positivos, 25 (15,6%, IC 95%: 10,4-22,2%) da área urbana e 23 (14,37%, 95% CI: 9,3-20,8%) da área rural (P > 0,05). Sequências parciais de DNAs obtidos a partir de produtos da PCR de 18 amostras da área urbana e 16 da área rural foram 100% idênticas a E. canis do Brasil e EUA. Este estudo relata a primeira detecção molecular de E. canis em cães da região norte do Pantanal.

Experimental Ehrlichia canis infection changes acute-phase proteins / A infecção experimental por Ehrlichia canis altera as proteínas de fase aguda

Early diagnosis of canine ehrlichiosis favors prompt institution of treatment and improves the prognosis for the animal, since this disease causes mortality among dogs. Studies have shown that determining the concentration of acute-phase proteins (APPs) may contribute towards early detection of disease and aid in predicting the prognosis. This study aimed to evaluate the APP profile in dogs experimentally infected with Ehrlichia canis, at the start of the infection and after treatment. It also investigated whether any correlation between APP levels and the clinical and laboratory alterations over the course of the disease would be possible. The results obtained showed abnormal levels of all the APPs on the third day after infection (D3), with the highest levels being reached on D18, with the exception of ceruloplasmin and acid glycoprotein, which presented their peaks on D6 and D12 respectively. We concluded that assessment of APP levels could contribute towards establishing an early diagnosis of canine ehrlichiosis, particularly regarding acid glycoprotein and ceruloplasmin, since these proteins were detected at increased levels even before the onset of clinical and laboratory findings of the disease.

O diagnóstico precoce da erliquiose canina favorece a pronta instituição do tratamento e melhora o prognóstico do animal, pois se trata de uma doença de alta mortalidade em cães. Estudos têm apontado que a determinação da concentração de proteínas de fase aguda (PFA) pode contribuir para detecção precoce de doenças e auxiliar na predição do prognóstico. O presente estudo objetivou avaliar o perfil de proteínas de fase aguda (PFA) em cães experimentalmente infectados com Ehrlichia canis, no início da infecção e após o tratamento. Além disso, se seria possível associá-las com as alterações clínico-laboratoriais durante o curso da doença. Os resultados obtidos evidenciaram que todas as PFA estudadas alteraram suas concentrações em D3 (dia 3), comparadas ao D0, atingindo concentrações máximas em D18, com exceção da ceruloplasmina e da glicoproteína ácida, cujos picos foram observados em D6 e D12, respectivamente. Concluímos que a avaliação das concentrações de PFA poderiam contribuir para o diagnóstico precoce da erliquiose canina, principalmente com relação à ceruloplasmina e glicoproteína ácida, pois seus aumentos foram anteriores ao aparecimento dos sinais clínicos e das alterações laboratoriais da doença.

Molecular and serological detection of Ehrlichia spp. in cats on São Luís Island, Maranhão, Brazil / Detecção molecular e sorológica de Ehrlichia spp. em gatos da ilha de São Luís, Maranhão, Brasil

Ehrlichiosis is a tick-borne disease that affects both humans and animals. The few existing reports on ehrlichiosis in Brazilian cats have been based on observation of morulae in leukocytes and, more recently, on molecular detection of Ehrlichia sp. In this study, we assessed occurrences of Ehrlichia sp. in the blood of 200 domestic cats in São Luís, Maranhão. Of the 200 animals tested, 11 (5.5%) were seropositive for Ehrlichia sp. and two (1%) were positive for Ehrlichia sp. in PCR. We also performed DNA sequence alignment to establish the identity of the parasite species infecting these animals, using the gene 16S rRNA. One cat presented infection with Ehrlichia sp. with 98% identity with E. canis, and another cat infected with Ehrlichia sp. showed 97% identity with E. chaffeensis. This is the first study on molecular detection of Ehrlichia sp. among domestic cats in São Luís, Maranhão.

Erliquiose é uma enfermidade transmitida por carrapatos que afeta seres humanos e animais. Os poucos relatos de erliquiose em gatos, no Brasil, são baseados na observação de mórulas em leucócitos e, mais recentemente, na detecção molecular de Ehrlichia sp. Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de Ehrlichia sp. no sangue de 200 gatos de São Luís, Maranhão. Dos 200 animais testados, 11 (5,5%) foram soropositivos para Ehrlichia sp. e dois (1%) foram positivos na PCR para Ehrlichia spp. O alinhamento de sequências de DNA baseado no gene 16S rRNA foi conduzido para estabelecer a identidade da espécie de parasito que infectou estes animais. Um gato apresentou infecção por uma espécie de Ehrlichia sp. com 98% de identidade com E. canis; e outro mostrou-se infectado por Ehrlichia sp. com 97% de identidade com E. chaffeensis. Este estudo traz a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gatos de São Luís, Maranhão.

Soroprevalência de anticorpos anti-Ehrlichia canis em cães de Cuiabá, Mato Grosso / Seroprevalence anti-Ehrlichia canis antibodies in dogs of Cuiabá, Mato Grosso

A erliquiose canina é uma doença transmitida por carrapatos Rhipicephalus sanguineus e ocasionada pela Ehrlichia canis, bactéria intracelular obrigatória. O presente estudo verificou a prevalência de anticorpos anti-E. canis em 254 cães de quatro regiões administrativas de Cuiabá, Estado de Mato Grosso, por imunofluorescência indireta, observando-se uma prevalência de 42,5 por cento (108/254) sem diferença significativa entre as regiões. As variáveis idade, raça, sexo, hábitat, acesso à zona rural e presença de carrapatos foram analisadas. Os títulos de anticorpos variaram entre 1:40 a 1:2.560. Somente 32 (29,63 por cento) cães soropositivos estavam infestados por carrapatos, todos R. sanguineus. O resultado encontrado confirma que não há predisposição racial, sexual ou etária, enquanto a menor ocorrência de cães reagentes no intradomicílio provavelmente está relacionada à baixa infestação por carrapato, apesar de não ter sido observada diferença significativa entre os cães com ou sem a infestação com o carrapato vetor.

Canine ehrlichiosis is a disease transmitted by ticks Rhipicephalus sanguineus and caused by Ehrlichia canis, obligatory intracellular bacteria. The present study examined the prevalence of anti-E. canis in 254 dogs from four administrative regions of Cuiabá, Mato Grosso, by indirect immunofluorescence assay. There was a prevalence of 42.5 percent (108/254) without significant difference between the studied regions. The variables age, breed, sex, habitat, access to rural and ticks were analyzed. The antibody titers ranged from 1:40 to 1:2,560. Only 32 (29.63 percent) seropositive dogs were infested with ticks, all R. sanguineus. The results confirm that do not have breed, sex or age predisposition to ehrlichiosis due E. canis, while the lowest occurrence of reactive dogs indoors probably related to low tick infestation, although no significant difference between dogs with or without infestation with the tick vector.

Comparação de nested-PCR com o diagnóstico direto na detecção de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em cães / Comparison of nested-PCR with blood smear examination in detection of Ehrlichia canis and Anaplasma platys in dogs

Os sinais clínicos das infecções por Ehrlichia canis e Anaplasma platys são similares, e o diagnóstico desses patógenos feito por esfregaços sanguíneos corados é difícil devido à sensibilidade e especificidade. Por outro lado, os diagnósticos moleculares são altamente sensíveis e específicos, e nested-PCRs têm sido otimizadas para o diagnóstico preciso desses patógenos em cães. Em um Hospital Veterinário Escola, amostras de sangue total com EDTA foram obtidas de 100 cães, e esfregaços foram feitos das amostras de sangue para busca dos parasitos intracelulares. Para cada amostra, DNA foi extraído e submetido à nPCR para detecção de E. canis e A. platys. Os resultados dos esfregaços sanguíneos mostraram que 9% dos animais foram positivos para E. canis e 21% para A. platys. Com relação à nPCR, 57 e 55% dos cães foram positivos para E. canis e A. platys, respectivamente. Quando comparados com a nPCR, os esfregaços sanguíneos corados revelaram resultados falso-negativos para E. canis e A. platys. Os resultados indicam que a nPCR é altamente sensível e específica para detecção de ambos os patógenos, e os diagnósticos moleculares podem ser mais úteis nos Hospitais Veterinários.

The clinical signs of Ehrlichia canis and Anaplasma platys infection are similar, and the diagnosis of these pathogens made by stained blood smears is poor due sensibility and specificity. On the other hand, the molecular diagnosis is highly sensitive and specific and nested-PCR have been optimized for accurate diagnosis these pathogens in dogs. At the veterinary teaching hospital, whole-blood samples with EDTA were obtained from 100 dogs and smears were made from blood samples for evaluation for intracellular parasites. For each sample, DNA was extracted and submitted to nPCR analysis for detection of E. canis and A. platys. The results of stained blood smears showed 9% of the animals were positive for E. canis and 21% for A. platys. Regarding of nPCR analysis, 57 and 55% of dogs were positive for E. canis and A. platys respectively. As compared to a nested PCR, the stained blood smears revealed false-negative results for both E. canis and A. platys. The results indicate that the nPCR is highly sensitive and specific for detection of both pathogens and the molecular diagnosis could be more useful at veterinary hospital.